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- La eosina al 0,5 % en etanol al 70 % es una solución que contiene el colorante sintético eosina (tetrabromofluoresceína, fórmula molecular: C?OH?Br?O?) en una solución de alcohol al 70 % a una concentración del 0,5 %.
- Esta solución de eosina se utiliza principalmente en histología y citología para teñir las estructuras celulares y la matriz extracelular.
- La eosina tiene una alta afinidad por estructuras básicas como las proteínas y suele teñirlas de rosa o rojo.
- El uso de una solución de alcohol al 70 % afecta la cinética y la calidad de la tinción.
- En comparación con otras concentraciones
PROTOCOLO EOSINA ALCOHOLICA (tabla 1):
- Desparafine y rehidrate el corte según corresponda de acuerdo con el procedimiento rutinario.
- Tiña con hematoxilina de acuerdo con el protocolo del fabricante.
- Lave con agua del grifo corriente.
- Diferencie en un alcohol ácido adecuado, lave en agua del grifo corriente.
- Sumerja en azulante, lave en agua del grifo corriente.
- Deshidrate en alcohol reactivo.
- Realice una contratinción con la eosina alcohólica seleccionada hasta que se alcance la intensidad deseada.
- Deshidrate, aclare y monte en medio de montaje.
RESULTADOS:
- Los núcleos y sus componentes deberán estar teñidos en diversos tonos de púrpura/azul.
- Los músculos deberán estar teñidos de rosa oscuro, los eritrocitos en naranja/rosa y el tejido conectivo en rosa pálido.
Tabla 1. Ejemplo de protocolo de tinción con H&E con eosina alcohólica
| Pasos |
Acción |
Sustancia química |
Tiempo (mm:ss) |
| 1 |
Desparafinación |
Xileno |
3:00 |
| 2 |
Desparafinación |
Xileno |
3:00 |
| 3 |
Desparafinación |
Xileno |
3:00 |
| 4 |
Hidratación |
Alcohol al 100 % |
2:00 |
| 5 |
Hidratación |
Alcohol al 100 % |
1:00 |
| 6 |
Hidratación |
Alcohol al 100 % |
1:00 |
| 7 |
Hidratación |
Alcohol al 80 % o al 95 % |
1:00 |
| 8 |
Hidratación |
Lavado con agua |
1:00 |
| 9 |
Tinción |
Hematoxilina progresiva |
1:00 a 5:00 |
| 10 |
Lavado |
Lavado con agua |
3:00 |
| 11 |
Diferenciación |
Diferenciador |
0:30 a 1:30 |
| 12 |
Lavado |
Lavado con agua |
1:00 |
| 13 |
Azulado |
Amortiguador de azulado |
0:30 a 1:00 |
| 14 |
Lavado |
Lavado con agua |
2:00 |
| 15 |
Deshidratación |
Alcohol del 80 % al 95 % |
1:00 |
| 16 |
Contratinción |
Eosina alcohólica |
0:30 a 1:30 |
| 17 |
Lavado |
Lavado con agua |
2:00 |
| 18 |
Deshidratación |
Alcohol del 95 % al 100 % |
1:00 |
| 19 |
Deshidratación |
Alcohol al 100 % |
1:00 |
| 20 |
Deshidratación |
Alcohol al 100 % |
1:00 |
| 21 |
Eliminación |
Xileno |
2:00 |
| 22 |
Eliminación |
Xileno |
2:00 |
| 23 |
Eliminación |
Xileno |
2:00 |
PROTOCOLO EOSINA ALCOHOLICA AL 1 % (tabla 2):
- Desparafine y rehidrate el corte según corresponda de acuerdo con el procedimiento rutinario.
- Tiña con hematoxilina de acuerdo con el protocolo del fabricante.
- Lave con agua del grifo corriente.
- Diferencie en un alcohol ácido adecuado, lave en agua del grifo corriente.
- Sumerja en azulante, lave en agua del grifo corriente.
- Realice una contratinción en eosina acuosa al 1 % durante 30 segundos o hasta que se logre la intensidad deseada.
- Lave con agua del grifo corriente.
- Deshidrate, aclare y monte en medio de montaje.
RESULTADOS::
- Ahora, los núcleos y sus componentes deberán estar teñidos en diversos tonos de púrpura/azul.
- Los eritrocitos son naranja/rosa, el músculo es rosa y el tejido conectivo es rosa pálido.