PRESENTACIONES

Los dialdehídos formados mediante el tratamiento con ácido peryódico a partir de ciertos carbohidratos reducen selectivamente una mezcla alcalina de hexamina y sal de plata.

• Este método es especialmente adecuado para las membranas basales glomerulares renales.
• Este método ayuda a determinar el grosor de las membranas basales glomerulares y la matriz mesangial.

Método

1. Desparafinar las secciones con xileno y luego llevarlas a través de alcoholes hasta agua destilada.
2. Enjuague bien con agua destilada.
3. Tratar con ácido peryódico al 0,5 % durante 5 minutos.
4. Enjuague bien con agua destilada.
5. Colóquelo en una solución de metenamina de plata recién filtrada a 58 - 60 grados C. Revise el portaobjetos microscópicamente después de 20 minutos y luego cada 5 minutos hasta que la membrana basal esté bien visible.
6. Enjuague bien con agua destilada.
7. Tono en cloruro de oro al 0,2% 2 minutos
8. Enjuague con agua destilada.
9. Tratar con tiosulfato de sodio al 2% (hipo) durante 2 minutos.
10. Lavar con agua corriente del grifo.

(NOTA: En este punto, las secciones se pueden diferenciar utilizando ácido sulfúrico al 0,5 % en cloruro férrico al 0,2 % si están sobreteñidas).

Teñir las secciones con H&E o cromotropo si se solicita.

Contratinción de hematoxilina y eosina

1. Tinción en solución de hematoxilina de Lillie Mayers durante 5 minutos.
2. Lavar con agua corriente del grifo durante 1 minuto.
3. Diferenciar en alcohol ácido (0,6%) 1-2 seg.
4. Enjuague con agua corriente del grifo.
5. Azul en el agua del grifo de Scotts
6. Enjuague bien con agua corriente del grifo.
7. Teñir en solución de eosina/floxina durante 2 minutos.
8. Deshidratar, aclarar y montar en DPX.

Contratinción cromotrópica

1. Mordiente en líquido Bouins a 58-60 grados durante 30 minutos.
2. Lavar bien con agua hasta que las secciones pierdan su color amarillo.
3. Tratar con ácido fosfotúngstico al 1% (preparar fresco semanalmente) 1 min
4. Lavar bien con agua.
5. Tinción con Chromotrope 2R 15 minutos
6. Enjuague rápidamente con agua destilada.
7. Deshidratar en alcoholes, aclarar en xileno y montar en DPX.